Título:	Estudo voltamétrico da interação dos íons Zn2+, Cu2+, Cd2+ e Pb2+ com a enzima catalaze.
Autoria:	SILVA, J. G. da S.
Ano de publicação:	2007
Referência:	2007.
Páginas:	118 f.
Conteúdo:	A catalase é uma enzima responsável pela redução de peróxido de hidrogênio (H202) a água (H20) e oxigênio (02), que apresenta alguns sítios de ligação para íons metálicos (Cys, His). A ligação entre a enzima e os íons metálicos pode causar mudanças conformacionais ou estabilizar a estrutura da enzima, resultando na sua inibição ou ativação. A inibição da CAT, que ocorre com excesso de metal, contribui para o aumento da geração de espécies reativas de oxigênio, levando ao estresse oxidativo. Neste trabalho, foi estudado separadamente a interação dos íons metálicos Zn2+, Cu2+, Cd2+ e Pb2+ com a catalase, em meio semelhante ao fisiológico, por voltametria de redissolução anódica de pulso diferencial (DPASV), voltametria cíclica (CV) e voltametria de pulso diferencial (DPV). Os objetivos principais deste trabalho foram verificar a existência de interações entre os íons metálicos e a CAT, determinar os parâmetros quantitativos do sistema (estequiometria, constante de dissociação (Kd) e potencial padrão de redução do complexo (Eo')) e identificar Ror meio de estudo teórico os possíveis sítios de ligação dos íons Zn2+, Cu2+, Cd + e Pb2+ na estrutura da catalase, com o propósito de permitir uma melhor compreensão do papel dos metais no estresse oxidativo. Os possíveis sítios de ligação do Zn2+, Cu +, Cd2+ e Pb2+ na molécula de CA T foram identificados, considerando apenas os sítios sem impedimento estérico contendo resíduos de histidina e cisteína, por meio de comparação dos parâmetros físico-químicos (MM, pl e MH) de peptídeos padrão que se ligam a zinco, cobre, cádmio e chumbo e dos peptídeos gerados na clivagem da CAT com as enzimas GluC2 e V8-proteinase. A formação de um complexo estável entre o Zn2+ e a CAT foi verificada utilizando tanto a DPASV (Kd = 1,62 X 10-11 moi L-1) quanto a CV (Kd = 2,98 X 10-11 mol L-1). Uma estequiometria de 20 íons Zn2+ para uma molécula de CAT foi determinada para a reação, sendo este valor bem próximo do número de possíveis sítios de ligação do íon Zn2+ identificados no estudo teórico (28 possíveis sítios de ligação). A formação de um complexo estável, com estequiometria de 16 íons Cu2+ para uma molécula de CAT (valor bem próximo do número de possíveis sítios de ligação do íon Cu2+ identificados no estudo teórico - 24 possíveis sítios de ligação), foi evidenciada pelo decaimento das correntes de oxidação/redução do metal com a adição da CAT à solução e pelo valor da constante de dissociação (Kd = 1,73 x 10-10 mol L-1 - DPASV, Kd = 1,25 X 10-10 mol L-1 - CV, Kd = 1,81 X 10-10 mol L-1 - DPV). A pequena diferença entre os valores teórico e experimental das estequiometrias dos complexos pode ser atribuída ao impedimento estérico de alguns sítios, considerados aptos nos estudos teóricos, ocasionada pelo tamanho da enzima e sua conformação na superfície do eletrodo e pelo pH do meio. Os valores de Kd calculados para os complexos Zn2+ - CAT e Cu2+ - CAT sugerem a participação do zinco e do cobre na inibição da enzima catalase pela formação de complexos estáveis, contribuindo desta maneira para o estresse oxidativo. Para os sistemas Cd2+ - CAT e Pb2+ - CA T não foi possível determinar a estequiometria e a constante de dissociação, pois foi observado um decaimento pouco expressivo (a corrente não foi eliminada completamente) da corrente de oxidação do cádmio e do chumbo com a adição de CAT, levando às seguintes hipóteses: os sítios de ligação para esses metais já estão ocupados, há impedimento estérico para as ligações, a interação não é estável, ou a concentração dos metais no meio não favorece a formação dos complexos com a catalase.
Thesagro:	Bovino Catalase
Palavras-chave:	Voltametria
Notas:	Dissertação (Mestrado em Química) - Instituto de Química, Universidade de Brasília, Brasília, DF. Orientadora: Clarissa Silva Pires de Castro, Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia.
Tipo do material:	Teses
Acesso:	openAccess
Aparece nas coleções:	Tese/dissertação (CENARGEN)