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Título: Desenvolvimento e padronização de um ELISA indireto para diagnóstico de Maedi Visna em ovinos.
Autoria: DANTAS, T. V. M.
ARAÚJO, S. A. C. de
PINHEIRO, R. R.
ARAGÃO, M. A. do C.
SILVA, J. B. A. da
RICARTE, A. R. F.
RIBEIRO, A. L.
TEIXEIRA, M. F. da S.
Afiliação: Tânia Valeska Medeiros Dantas, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE); Suzana Aparecida Costa de Araújo, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE); RAYMUNDO RIZALDO PINHEIRO, CNPC; Maria Alzira do Carmo Aragão, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE); Jean Berg Alves da Silva, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE); Aracely Rafaelle Fernandes Ricarte, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE); Adriana Lopes Ribeiro, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE); Maria Fátima da Silva Teixeira, pós-graduanda da Universidade Estadual do Ceará (UECE).
Ano de publicação: 2008
Referência: Ciência Animal Brasileira, v. 9, n. 1, p. 181-187, jan./mar. 2008.
Conteúdo: O objetivo deste trabalho foi desenvolver e padronizar um ELISA indireto para diagnóstico de Maedi Visna (MV). Produziu-se o antígeno em sobrenadantes de cultivo celular de membrana sinovial caprina (MSC) inoculado com o Maedi Visna Vírus (MVV) cepa K1514, que passou por ciclos de congelamento e descongelamento, sendo logo após clarificado por centrifugação a 3.000 g por 40 minutos A suspensão clarificada foi precipitada por PEG 8000, centrifugada a 12.000 g por 60 minutos, o pellet ressuspendido em TNE (Tampão Tris-HCl, NaCl, EDTA) e ultracentrifugado a 42.000 g por 105 minutos em colchão de sacarose, e ressuspendido em PBS contendo phenylmethylsulphonyl fluoride (PMSF). Realizou-se o ELISA em microplacas de 96 poços, incubadas por 1h a 37 ºC, utilizando-se como revelador o-phenylenediamine (OPD). Para a comparação entre os testes de ELISA e AGID, utilizaram-se 175 amostras de soros. A concentração ótima do antígeno foi a de 2 µg/mL e a melhor diluição dos soros, controles e testes de 1:100. O ELISA detectou um maior número de positivos (40) que o AGID (11), apresentando uma sensibilidade de 91%, especificidade de 82%. O ELISA promoveu uma melhor sensibilidade que o AGID. Embora sua especificidade tenha ficado abaixo do esperado, seu uso pode ser indicado como teste de diagnóstico de MVV.
Thesagro: Doença Animal
Elisa
Ovino
NAL Thesaurus: Lentivirus
Palavras-chave: Maedi visna
Diagnóstico sorológico
Teste
Brasil
Ceará
Tipo do material: Artigo de periódico
Acesso: openAccess
Aparece nas coleções:Artigo em periódico indexado (CNPC)

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