Tese/dissertação (CENARGEN) https://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/item/300 2026-08-03T07:15:07Z 2026-08-03T07:15:07Z SANTOS, M. C. A. dos https://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/1168221 2025-03-16T06:31:10Z 2024-01-01T00:00:00Z

Título: Criopreservação de calos e respostas à indução da embriogênese somática e à regeneração de plantas em múltiplos acessos de cacaueiro (Theobroma cacao L.). Autoria: SANTOS, M. C. A. dos Conteúdo: O Brasil abriga um dos maiores Bancos de Germoplasma de cacaueiro do mundo, com mais de 4.500 acessos conservados em campo. No entanto, esses acessos estão ameaçados por condições ambientais adversas. Este estudo teve como um dos objetivos avaliar estratégias de conservação ex situ de cacaueiros por meio da criopreservação de calos a partir de diferentes acessos, tipos de explantes e métodos de criopreservação. Num segundo momento, o trabalho se propôs a avaliar o efeito genotípico de 24 genótipos de cacaueiros quanto a indução da embriogênese somática e regeneração de plantas. No primeiro experimento, acessos comerciais (CCN-51, CEPEC 2002 e PH 16) e não comerciais (752 e 762) foram estudados, utilizando explantes de estaminódios inteiros e a parte basal dos estaminódios. Analisaram-se pré-tratamentos de criopreservação, como pré-cultivo em sacarose e tempos de imersão em soluções de vitrificação (PVS2) e técnicas como vitrificação, droplet vitrification e slow cooling. O potencial embriogênico e reações adversas também foram avaliados. Os resultados mostraram que, no pré-cultivo em sacarose, os genótipos comerciais apresentaram altas taxas de sobrevivência de calos, com destaque para CCN-51 e CEPEC 2002, que atingiram 100%. Na imersão em loading solution, o genótipo 752 obteve 100% de formação de calos em tempos de imersão mais longos. Nos experimentos de imersão em PVS2 e nitrogênio líquido (NL), observou-se uma redução significativa na viabilidade de calos, especialmente em explantes oriundos de partes basais. Na droplet vitrification, foram encontrados mais calos com células embriogênicas, embora houvesse a presença de oxidação em grande parte das amostras. No segundo experimento, foram avaliados 24 genótipos quanto à embriogênese somática. A análise fenotípica revelou variações de coloração nos botões florais e estaminódios. A formação de calos variou significativamente entre os genótipos, com destaque para aqueles que apresentaram calos granulares e nodulares. Após 35 dias, observou-se formação de embriões somáticos, que se desenvolveram principalmente na base dos estaminódios. O genótipo 4025 M153 se destacou com 330 embriões formados, porém, muitos embriões apresentaram má formação, necessitando de ajustes nos protocolos. Conclui-se que a criopreservação em ultrabaixas temperaturas manteve a viabilidade dos calos, mas futuras otimizações são necessárias. A embriogênese somática também revelou variações genotípicas, sugerindo que ajustes nos protocolos podem melhorar a regeneração de plantas completas.

2024-01-01T00:00:00Z VASCONCELOS, A. D. M. https://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/1168223 2025-03-16T06:32:26Z 2024-01-01T00:00:00Z

Título: Estabelecimento de culturas em suspensão de Euterpe precatoria MART. (Arecaceae). Autoria: VASCONCELOS, A. D. M. Conteúdo: A palmeira Euterpe precatoria Mart. (açaí-solteiro), conhecida mundialmente possui grande importância econômica no Brasil. Originário da Floresta Amazônica, é consumido como alimento básico por muitas comunidades na região. O açaí é uma palmeira que vai além dos seus usos tradicionais devido sua relevância nutricional e seus benefícios para a saúde humana. O açaí é uma palmeira tão importante para nutrição humana, que recebeu outro título, o de “super fruto”, tornando-a ainda mais importante economicamente. O fruto ganhou reconhecimento internacionalmente devido às suas propriedades energéticas e sua riqueza em minerais, ácidos graxos, antocianinas e antioxidantes. Essas características têm impulsionado o consumo da polpa de açaí nos últimos anos. Assim, objetivou-se, nesta pesquisa, estabelecer linhagens embriogênicas em meio de consistência líquida (suspensão celular) e avaliar a cinética do crescimento de estruturas embriogênicas de E. precatoria Mart, oriundas de embriões zigóticos, tecidos foliares jovens e inflorescências imaturas. É importante destacar que, até agora, não há relatos na literatura sobre o uso dessa técnica para a reprodução dessa espécie. No primeiro artigo, avaliou-se o crescimento oito linhagens (L1-L6 e L8), oriundas de tecidos foliares, embriões zigóticos e inflorescência imaturas, em meio líquido (500 mg calos embriogênicos) de MS suplementados com 5 μM Picloram (5 linhagens) e, para fins comparação em meio semissólido (1,050 g de calo embriogênico) de MS suplementado com 13,57 μM Picloram (3 linhagens). A curva de crescimento foi obtida a partir da pesagem dos calos entre 60 até 180 dias de cultivo. O modelo Gompertz foi aplicado e a cinética de crescimento foi avaliada. Aos 100 dias, verificaram-se o teor de açúcares e proteínas solúveis totais. O cultivo de linhagens de E. precatoria em meio de consistência líquida foi realizado com sucesso e o estabelecimento foi obtido. As linhagens apresentaram diferenças estatísticas na curva de crescimento. Foi verificada a ausência da fase lag (dia). O modelo de Gompertz pode ser adequado, uma vez que descreve mais de 90% da cinética de crescimento das linhagens. A análise multivariada revela elevado incremento de massa em culturas líquidas, representadas pelas linhagens L6 e L2. Diferenças estatísticas foram constatadas nos teores de Açúcares Solúveis Totais (AST), e os maiores níveis foram observados nas linhagens cultivadas em meio líquido. O teor de proteínas encontrado foi muito baixo, apesentando diferenças estatísticas entre as linhagens. A multiplicação apresenta comportamento ao longo dos subcultivos, tanto entre linhagens quanto entre períodos de cultivo. No segundo artigo, avaliouse a otimização do protocolo, utilizando materiais somáticos de origem foliar. Seis linhagens (LT1- LT6) foram avaliadas em seis meios diferentes, sendo os meios respectivamente PIC; PIC+AIB: PIC+ANA; 2,4-D; 2,4-D+AIB e 2,4-D+ANA. Avaliaram-se, ao longo de 180 dias de cultivo, a oxidação, o volume e contaminação. A análise dos componentes principais foi estimada. O modelo Gompertz foi aplicado e a cinética do crescimento foi determinada. O protocolo foi otimizado com sucesso. Os resultados obtidos foram acima do esperado, tendo uma taxa de crescimento médios acima dos 1.400%. Aos 100 dias, verificou-se que os calos apresentaram competência embriogênica. A dinâmica de crescimento foi variável entre as linhagens. As linhagens apresentaram diferenças estatísticas na curva de crescimento. A fase lag (dia) foi determinada neste estudo. O modelo de Gompertz pode ser adequado, com curvas sigmoides uma vez que descreve mais de 70% da cinética de crescimento das linhagens. A análise multivariada revela que há similaridade entre as linhagens. O protocolo de cultivos de açaí-solteiro em meio de consistência líquida foi otimizado. A produção de calos embriogênicos friáveis foi melhorada. As linhagens apresentaram diferença significativa em razão do efeito das composições dos meios de cultivo ao longo do tempo. A oxidação não impede a produção de calos embriogênicos friáveis. Os calos podem ser multiplicados tanto usando auxina Picloram quanto 2-4-D. As análises anatômicas revelam que os calos têm competência embriogênica.

2024-01-01T00:00:00Z FERRAZ, M. https://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/1087736 2026-07-21T10:51:58Z 2016-01-01T00:00:00Z

Título: Conservação de sementes de espécies da subtribo Hyptidinae (Lamiaceae) nativas do semiárido baiano. Autoria: FERRAZ, M. Conteúdo: A caatinga é um bioma com uma grande diversidade biológica, endemismos egrande potencial para produção de compostos bioativos de interesse econômico, porém com uma grande carência de informações sobre as espécies vegetais e suas formas de conservação.Neste trabalho, com o objetivo de diminuir essa carência e garantir sua conservação genética, oito espécies da subtribo Hyptidinae (Lamiaceae):Eplingiella fruticosa (Salzm. ex Benth.) Harley & J.F.B.Pastore, Gymneia platanifolia (Salzm. ex Benth.) Harley & J.F.B.Pastore, Hyptis lanceolata Poir., Hyptis ramosa Pohl ex Benth.,Hyptis velutina Pohl ex Benth.,Martianthus leucocephalus (Salzm. ex Benth.) J.F.B.Pastore, Mesosphaerum pectinatum (L.) Kuntze, Mesosphaerum suaveolens (L.) Kuntze., tiveram as sementes caracterizadas, foi feita a extração da mucilagem e o armazenamento por vinte e quatro meses em quatro ambientes distintos: 10°C sem controle de umidade, a 10°C e 25°C com solução saturada de cloreto de zinco, e em nitrogênio líquido a -196 °C. A cada três meses foi testada a resposta germinativa para avaliar a eficiência do armazenamento na conservação das sementes. Foi testada a eficácia do uso de imagem de raio X na avaliação da qualidade das sementes armazenadas.O teor de umidade das sementes variou de 1,98% a 8,05%, adequados ao armazenamento.E. fruticosa, M. pectinatum e M. suaveolens podem vir a ser boas fontes de mucilagem por apresentar alto rendimento.Os ambientes com baixa umidade relativa (5,5%) mantida pelo cloreto de zinco se mostraram eficientes no armazenamento das sementes de cinco das oito espécies avaliadas mantendo a viabilidade durante o período avaliado. A análise da imagem de raio X é eficaz na avaliação da qualidade das sementes.

2016-01-01T00:00:00Z VERLY. R. M. https://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/882864 2025-08-16T20:27:51Z 2010-01-01T00:00:00Z

Título: Peptídeos antimicrobianos: síntese, ensaios biológicos, estudos termodinâmicos e análise estrutural por RMN em meios biomiméticos. Autoria: VERLY. R. M. Conteúdo: Muitos organismos empregam substâncias químicas ativas como, por exemplo, aminas, derivados de esteróides, alcalóides e peptídeos para se defender de predadores e de microrganismos patogênicos. Dentre essas substâncias químicas destacam-se os peptídeos que podem ser encontrados em uma vasta variedade de organismos, incluindo bactérias, fungos, plantas, insetos, peixes, anfíbios, aracnídeos e mamíferos. A grande maioria destes peptídeos apresenta propriedade antimicrobiana cujo mecanismo de ação não depende da interação com um receptor específico, tornando-os opções alternativas aos antibióticos disponíveis comercialmente. Entretanto, o mecanismo pelo qual peptídeos exercem sua atividade antimicrobiana ainda não é completamente definido e muitos estudos são necessários para uma maior compreensão do modo de ação destas moléculas em células bacteriana. O presente estudo teve como objetivo geral obter informações termo dinâmicas e estruturais de peptídeos antimicrobianos em ambientes que mimetizam membranas biológicas, buscando contribuir para o entendimento de seus mecanismos de ação. Neste trabalho foram sintetizados por técnica manual, pela síntese em fase sólida, os peptídeos dermadistinctina K (DD K), homotarsinina (HMT-2) e LyeTx L. O peptídeo antimicrobiano DD K foi isolado previamente da pele do anfíbio Phyllomedusa distincta. O efeito do colesterol na interação do peptídeo sintético DD K com lipossomas de 1,2 dipalmitolifosfatidilcolina foi investigado por medidas de cinética de extravasamento de carboxifluoresceína (CF), espalhamento de luz dinâmica (DLS) e calorimetria de titulação isotérmica (lTC). A taxa de liberação de CF foi significativamente reduzida pela presença de colesterol. Os resultados de DLS mostraram um aumento no tamanho dos lipossomas sem colesterol quando titulados com DD K, porém a adição de colesterol reduziu o efeito de DD K no aumento do tamanho dos lipossomas. Os estudos por ITC demonstraram também que a ligação de DD K com lipossomas é significativamente afetada pelo colesterol, o que contribui para explicar a baixa atividade hemolítica do peptídeo. As preferências conformacionais de DD K foram estudadas por espectroscopia de dicroísmo circular (CD) na presença de ambientes miméticos de membranas, como trifluoroetanol/água (TFE/H20), micelas de dodecifosfocolina (DPC) e dodecilsufato de sódio (SDS) ou lipossomas de palmitoil- oleoil-fosfatidilcolina (POPC) e de palmitoil-oleoil-fosfatidilglicerol (POPG). Os resultados mostraram que o DD K apresenta uma estrutura randômica em meio aquoso, porém ao se associar à membrana adota uma conformação helicoidal. Assim, a estrutura tridimensional de DD K foi estudada na presença de micelas DPC por espectroscopia bidimensional de RMN em solução. Os resultados mostraram uma conformação a-hélice anfipática a partir do sétimo resíduo e que se estende até a região C-terminal. Neste trabalho foram realizados também os estudos estruturais, termodinâmicos e biológicos comparativos entre o peptídeo antimicrobiano homotarsinina (HMT -2), isolado de anuros da espécie Phyllomedusa tarsius, e sua forma monomérica (HMT-l). O peptídeo de ocorrência natural HMT-2 mostrou-se mais ativo contra as bactérias Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa do que sua cadeia monomérica HMT -1. Os resultados termodinâmicos indicaram maior interação do peptídeo dimérico com lipossomas de POPC e POPG em relação ao peptídeo monomérico, justificando a maior atividade antimicrobiana de HMT-2. Comparações entre resultados de CD revelaram maior propensão à formação de estrutura a-helicoidal de HMT-2 do que HMT-l. Os estudos detalhados das estruturas tri-dimensionais por RMN mostraram diferenças significativas na orientação das cadeias monoméricas de HMT-2 em meio aquoso e em ambiente de membrana. A estrutura mais fechada de HMT-2 em solução aquosa pode indicar um mecanismo de proteção do peptídeo frente a proteases, enquanto uma estrutura estendida, formada em micelas de DPC, leva a uma maior superfície de contato entre peptídeo e membrana. O peptídeo LyeTx I, isolado do veneno de Lycosa erythrognata, conhecida como aranha lobo, foi sintetizado para estudos de sua atividade antimicrobiana e determinação estrutural por CD e RMN. As comparações dos ensaios antimicrobianos de LyeTx I e fármacos comerciais mostraram que o peptídeo é ativo contra as bactérias Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa. Os resultados de CD mostraram que LyeTx I na presença de pope contendo colesterol tem uma diminuição na conformação helicoidal e, juntamente com a baixa atividade hemolítica, indicam que as membranas bacterianas são alvos preferenciais em relação a membranas de vertebrados. Os resultados de RMN de LyeTx I apontam para uma pequena estruturação da região N-terminal seguida por uma a-hélice do sexto resíduo até a região C-terminal amidada, o que pode favorecer a interação peptídeo-membrana.

2010-01-01T00:00:00Z