Title:	In vitro culture of parasitic stages of Haemonchus contortus.
Authors:	NICIURA, S. C. M. MINHO, A. P. MCINTYRE, J. BENAVIDES, M. V. OKINO, C. H. ESTEVES, S. N. CHAGAS, A. C. de S. AMARANTE, A. F. T. DO
Affiliation:	SIMONE CRISTINA MEO NICIURA, CPPSE; ALESSANDRO PELEGRINE MINHO, CPPSE; JENNIFER MCINTYRE, University of Glasgow; MAGDA VIEIRA BENAVIDES, CPPSUL; CINTIA HIROMI OKINO, CPPSE; SERGIO NOVITA ESTEVES, CPPSE; ANA CAROLINA DE SOUZA CHAGAS, CPPSE; ALESSANDRO FRANCISCO TALAMINI DO AMARANTE, Universidade Estadual Paulista.
Date Issued:	2023
Citation:	Revista Brasileira de Parasitologia Veterinária, v. 32, n. 1, 2023, e010122.
Pages:	12 p.
Description:	Haemonchus contortus provoca grandes prejuízos à ovinocultura. Visando reduzir a utilização de ovinos hospedeiros e produzir estágios parasitários em larga escala, um protocolo para o cultivo in vitro por 42 dias de larvas de terceiro estádio de H. contortus foi realizado em meio Eagle, modificado por Dulbecco (DMEM). No cultivo sem células, as larvas foram mantidas a 39,6°C e incubadas em DMEM ácido (pH 6,1) por 3 ou 6 dias com 4?-ácido dafacrônico seguido por DMEM pH 7,4 suplementado ou não com reagente de Fildes. Em DMEM pH 7,4 a 37°C, a suplementação com células Caco-2 foi comparada à suplementação com Fildes. No Dia 14, as taxas de desenvolvimento até o quarto estádio larvar (L4) foram similares em meio ácido sem células suplementado (86,8?88,4%) ou não (74,4?77,8%) com Fildes e em co-cultura com células Caco-2 (92,6%), e superiores ao desenvolvimento em DMEM pH 7,4 com Fildes (0,0%). No Dia 21, o co-cultivo com células Caco-2 resultou em maior diferenciação (25,0%) e menor degeneração (13,9%) das larvas em comparação ao meio ácido (1,5?8,1% e 48,6?69,9%, respectivamente). Este é o primeiro relato de cultivo in vitro prolongado de H. contortus em meio comercial em co-cultivo com células Caco-2. Apesar da ausência de progressão até o estágio adulto, o co-cultivo com células Caco-2 resultou em diferenciação de L4 e manutenção da viabilidade das larvas de H. contortus por até 28 dias in vitro.
NAL Thesaurus:	Gastrointestinal nematodes Sheep
Keywords:	Larva de quarto estádio Cultivo in vitro de longa duração Nematoides gastrintestinais Ovinos Substituição de metodologias in vivo Fourth stage larvae Prolonged in vitro culture Replacement of in vivo methods
DOI:	https://doi.org/10.1590/S1984-29612023005
Type of Material:	Artigo de periódico
Access:	openAccess
Appears in Collections:	Artigo em periódico indexado (CPPSE)