Título:	Desenvolvimento de dot-blot para detecção de anticorpos para o vírus da Artrite Encefalite Caprina em caprinos.
Autor:	PINHEIRO, R. R. OLORTEGUI, C. D. C. GOUVEIRA, A. M. G. ARAÚJO, S. C. ANDRIOLI, A.
Afiliación:	RAYMUNDO RIZALDO PINHEIRO, CNPC Carlos Delfin Chaves Olortegui, Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), Belo Horizonte, MG Aurora Maria Guimarães Gouveia, UFMG Simone Costa Araujo, UFMG ALICE ANDRIOLI, CNPC.
Año:	2006
Referencia:	Revista Portuguesa de Ciências Veterinárias, v. 101, p. 51-56, 2006.
Descripción:	Resumo: A técnica de imunodifusão em gel de ágar (IDGA) é empregada mundialmente como método de triagem e monitoramento das fases iniciais de programas de controle das lentiviroses de pequenos ruminantes, mas apesar da boa especificidade, a IDGA pode apresentar resultados falso-negativos. Este trabalho teve como objetivo padronizar o teste Dot-Blot (DB) para a detecção de anticorpos, em caprinos, contra o Lentivírus Caprino (LVC), utilizando antígeno experimental preparado a partir do vírus total, e compará-lo com a IDGA e com ELISA indireto (ELISA-i). Na realização do (DB) a membrana de nitrocelulose (MN) foi disposta num aparelho de blot de 96 poços acrescentando antígeno com uma concentração de 0,5 mg de proteína/poço. Colocaram-se as tiras de MN em tubos de ensaio contendo soro teste diluído (1:50). Após, distribuiu-se o conjugado (peroxidase IgG coelho anti-cabra) diluído 1:500 em PBS-T e revelou-se a MN numa solução de DAB/4-Cloronapthtol. Num total de 327 amostras verificou-se que o ELISA-i detectou 209 caprinos positivos, o DB detectou 200, enquanto a IDGA detectou 144 animais. O DB mostrou concordância de 90,2% (p<0,01) com o Elisa-i. O DB é um teste mais sensível que a IDGA e comparável ao ELISA-i, além de não necessitar da indumentária tecnológica do ELISA-i, podendo ser utilizado em eventos agropecuários ou até mesmo na propriedade. Summary: The imunodifusion in agar gel technique (IDGA) is used worldwide as a screening method of monitoring the initial phases of programs to control lentivirosis of small ruminants. Despite of the good specificity, the IDGA can present false-negative results. The objective of this work was to standardize the Dot-Blot test (DB) for the detention of antibodies against Lentivírus Caprine (LVC), using a prepared experimental antigen from the total virus. The DB was compared with the IDGA and indirect ELISA (ELISA-i) tests. The DB test was accomplished by used a nitrocelulose membrane (MN) in a device of blot of 96 wells and the antigen placed in a concentration of 0.5 mg of protein/well. The strips of MN placed in separated tubes and serum tests added at dilution of 1:50. After that, the conjugated peroxidase IgG rabbit anti-goat diluted 1:500 in PBS-T was incubated for 60 minutes. The DAB/4-Cloronapthtol solution was used to reveal the reaction. From a total of 327 samples, we verified that the ELISA-i detected 209 positives goat, the DB detected 200, while the IDGA 144 animals. The DB showed agreement of 90.2% (p<0.01) with the Elisa-i. The DB is a test more viable than the IDGA and comparable to the ELISA-i test. Besides being more sensible than the IDGA, it does not need the technological equipment of the ELISA-i, being able to be used in animals for events or in the field.
Thesagro:	Caprino Doença animal Diagnóstico
NAL Thesaurus:	Lentivirus
Palabras clave:	Dot-Blot
Tipo de Material:	Artigo de periódico
Acceso:	openAccess
Aparece en las colecciones:	Artigo em periódico indexado (CNPC)