Title:	Padronização do Elisa indireto e Western Blot para diagnóstico da artrite-encefalite caprina.
Authors:	RODRIGUES, A. S. BRITO, R. L. L. PINHEIRO, R. R. DIAS, D. P. ALVES, S. M. SOUZA, T. S. SOUZA, K. C. AZEVEDO, D. A. A. ANDRIOLI, A. MAGALHÃES, D. C. T. TEIXEIRA, M. F. S.
Affiliation:	Universidade Estadual do Ceará (UECe) - Fortaleza, CE Pós-graduação - Universidade Estadual Paulista (Unesp) - Jaboticabal, SP RAYMUNDO RIZALDO PINHEIRO, CNPC (UECe) - Fortaleza, CE Universidade Estadual Vale do Acaraú (UVA) - Sobral, CE Pós-graduação - Universidade Federal da Bahia (UFBA) - Salvador, BA Pós-graduação - UECe - Fortaleza, CE UVA - Sobral, CE ALICE ANDRIOLI, CNPC Agência de Defesa Agropecuária do Estado do Ceará (ADAGRI) - Sobral, CE (UECe) - Fortaleza, CE.
Date Issued:	2014
Citation:	Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, Viçosa, MG, v. 66, n. 2, p. 417-424, 2014.
Description:	Resumo: A artrite-encefalite caprina (CAE) é diagnosticada rotineiramente pela técnica de imunodifusão em gel de agarose (IDGA), que é considerada pouco sensível. Objetivou-se com este estudo padronizar testes de Elisa-i e Western Blot (WB) para diagnóstico precoce de anticorpos em caprinos contra CAEV e comparar os resultados obtidos nesses testes com a prova de IDGA. Para a padronização dos testes Elisa-i e WB, utilizaram-se diferentes concentrações e diluições de antígeno, soros e conjugado. No Elisa-i, adotaram-se microplacas rígidas com 96 poços, sendo a combinação de concentração de 0,5µg/poço de antígeno e diluições de 1:100 de soro e 1:1500 de conjugado a que apresentou melhor resultado. No WB foram utilizadas membranas de nitrocelulose, definindo-se as diluições de 1:50 de soro e 1:15000 de conjugado. Para avaliar o desempenho das técnicas, 222 amostras de soro caprino foram testadas e os dados obtidos foram comparados com o IDGA. A sensibilidade e a especificidade do Elisa-i/IDGA, WB/IDGA e WB/Elisa-i foram de 70% e 91%, 100% e 72,6%, 84,6% e 76,5%, concomitantemente. O índice Kappa desses testes foi de 0,35, 0,2 e 0,36, respectivamente. As técnicas de Elisa-i e WB apresentaram-se mais sensíveis que a IDGA, podendo ser utilizadas como ferramentas para o diagnóstico precoce da CAE. [Standardization of indirect Elisa and Western Blot for diagnosis of Caprine Arthritis-Encephalitis]. Abstract: Caprine arthritis-encephalitis (CAE) is routinely diagnosed with the Agarose Gel Immunodiffusion (AGID) technique, which is considered to have low sensitivity. The objective of this study was to standardize testing i-Elisa and Western Blot for early detection of antibodies against CAEV in goats and compare the results obtained in these tests with proof of AGID. For standardization of i-Elisa and WB, different concentrations and dilutions of antigen, sera and conjugate were used. In the i-Elisa, rigid microplate with 96 wells was adopted, and the combination that showed the best result was a concentration of 0.5µg/ well of antigen and dilutions of the serum of 1:100 and conjugate of 1:1500. In the WB nitrocellulose membranes were used, and the dilutions of the serum were defined at 1:50 and conjugate at 1:15000. To evaluate the performance of the techniques, 222 goat serum samples were tested and the data were compared with the AGID. The sensitivity and specificity of Elisa-i/IDGA, WB/AGID and WB/Elisa-i were 70% and 91%, 100% and 72.6%, 84.6% and 76.5%, concomitantly. The Kappa index of these tests was 0.35, 0.2 and 0.36, respectively. The i-Elisa and WB techniques were more sensitive than the AGID and can be used as tools for early diagnosis of CAE.
Thesagro:	Caprino Doença animal Infecção Anticorpo Diagnóstico Elisa
NAL Thesaurus:	Goats Diagnostic techniques Serology Infection Immunoblotting
Keywords:	Sorologia Artrite-encefalite caprina LVPR SRLV CAEV Caprine arthritis encephalit virus
DOI:	http://dx.doi.org/10.1590/1678-41626303
Type of Material:	Artigo de periódico
Access:	openAccess
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