Title:	Estudo do mecanismo de ação antifúngica de quitooligossacarídeos de quitosana e prospecção de outras aplicações biotecnológicas.
Authors:	AZEVEDO, M. I. G. DE
Affiliation:	MAYARA ITALA GERONIMO DE AZEVEDO, UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ.
Date Issued:	2024
Citation:	2024. 107 f. Tese (Doutorado em Bioquímica) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza.
Description:	A quitosana é um polissacarídeo natural derivado da quitina que possui diversas aplicações biotecnológicas. Entretanto, a insolubilidade em valores neutros de pH e alta viscosidade são fatores que limitam a aplicabilidade desse polímero. Em contrapartida, os oligossacarídeos obtidos da hidrólise de quitosana, denominados de quitooligossacarídeos (QOS), não possuem as limitações físico-químicas da mesma e apresentam atividades biológicas que podem ter aplicações práticas, como ação antimicrobiana, inseticida, antitumoral, e anti-HIV, bem como elicitação de defesas de plantas. QOS podem ser produzidos por métodos físicos, químicos e enzimáticos, porém o método enzimático é mais eficiente na produção de moléculas com grau de polimerização bem definidos e não traz malefícios ao meio ambiente. O presente trabalho teve como objetivo explorar o potencial de QOS produzidos por via enzimática pela quitosanase CvCsn46 de Chromobacterium violaceum frente as seguintes atividades biológicas: ação antifúngica, proteção de frutos e ação inseticida. A investigação sobre a atividade antifúngica contra diferentes espécies de Candida (C. albicans, C. krusei, C. parapsilosis e C. tropicalis) mostrou que os QOS produzidos apresentaram atividade inibitória contra 8 das 10 estirpes utilizadas, com a MIC variando de 78 a 1.250 µg/mL e atividade letal contra 6 as 10 estirpes, com CLM variando de 156 a 625 µg/mL. Aprofundando as análises com duas espécies não- albicans (C. krusei ATCC 6258 e C. parapsilosis ATCC 22019), foi observado que o tempo de morte de C. krusei quando em contato com QOS na concentração letal (312 µg/mL) é de 4 horas e de C. parapsilosis (CLM = 312 µg/mL) é de apenas 2 horas. Resultados dos testes relacionados a formação e degradação de biofilme apontaram que apesar de QOS não apresentar efeito sobre a formação do biofilme das duas espécies testadas, essas moléculas foram capazes de degradar 41.5% do biofilme de C. krusei e 22.5% do biofilme de C. parapsilosis quando o dobro da MIC foi utilizado. Análises sobre o modo de ação dos QOS mostraram que essas moléculas afetam severamente a membrana celular dessas leveduras, além de estimular a produção de espécies reativas de oxigênio e provocar danos morfológicos, evidenciados por análises de citometria de fluxo, microscopia de fluorescência e microscopia eletrônica de varredura. Nas análises sobre a capacidade de QOS na proteção de frutos na fase de pós- colheita, foi utilizado o melão Cantaloupe minimamente processado. As frutas tratadas com QOS (1 g/L) foram capazes de manter a sua firmeza, pH e conteúdo de vitamina C quando comparadas com o controle, além de demonstrar melhor capacidade antioxidante total e enzimática antioxidante. No que concerne ao efeito inseticida, apesar de QOS não demonstrar atividade larvicida contra larvas de Aedes aegypti quando essas moléculas foram utilizadas sozinhas, QOS foi capaz de potencializar a atividade larvicida das toxinas Bt. A ação conjunta da CL 20 (11.01 ng/mL) das toxinas Bt com QOS em diferentes concentrações (de 500 a 32 µg/mL) causaram severos danos ao intestino médio das larvas tratadas. O presente trabalho demonstrou a atividade de quitooligossacarídeos produzidos pela quitosanase de C. violaceum contra fungos, na proteção de frutos pós-colheita e contra insetos, evidenciando o potencial de QOS em diversas áreas.
Keywords:	Espécies de Candida Larvicida Defesa de plantas Candida species Plant defense Insecticidal
Notes:	Co-orientadora: Dra. Christiana de Fátima Bruce da Silva
Type of Material:	Teses
Access:	openAccess
Appears in Collections:	Tese/dissertação (CNPAT)