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Título: Ajustes no protocolo de DNA CTAB 2x para extração de DNA em diversas espécies vegetais.
Autoria: LIMA, R. S. N.
SANTOS, C. A. F.
RODRIGUES, M. A.
BATISTA, P. P.
Afiliação: ROBERTA SAMARA NUNES DE LIMA, CNPq
CARLOS ANTONIO FERNANDES SANTOS, CPATSA
MARCIENE AMORIM RODRIGUES, CNPq
PATRÍCIA PIRES BATISTA, CNPq.
Ano de publicação: 2007
Referência: In: JORNADA DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA SEMI-ÁRIDO, 2., 2007, Petrolina. Anais... Petrolina: Embrapa Semi-Árido, 2007.
Conteúdo: Diversas técnicas de biologia molecular estão disponíveis para a detecção da variabilidade genética ao nível de seqüência de DNA. O objetivo do presente trabalho foi ajustar a técnica de extração de DNA a partir de diferentes concentrações de -mercaptoetanol, utilizando o protocolo CTAB 2X. DNA genômico total foi isolado de folhas verdes e sadias em espécies distintas como umbuzeiro, mangueira, cebola e goiabeira, segundo protocolo do CTAB 2X com algumas adaptações (500 mM Tris pH 8,0; 1,4 M NaCl; CTAB 0,2% (p/v); 2% -mercaptoetanol; 20 mM de EDTA). A concentração do mercaptoetanol utilizado foi de 2%, um aumento de 10X em relação ao protocolo padrão. A concentração e a integridade do DNA genômico foram observadas em géis 0.8% de agarose comum, comparado a um DNA lambda de 30, 50 e 100 ng/mL. As amostras extraídas com a concentração de 2% de -mercaptoetanol tiveram melhores resultados, comparando-se com a concentração de 0,2% estabelecida no protocolo CTAB. Este procedimento resultou em extração satisfatória para a maioria dos métodos de amplificação de DNA via PCR, nas distintas espécies estudadas.
Thesagro: DNA
Extração
Biologia Molecular
Melhoramento Genético Vegetal
NAL Thesaurus: Genetic improvement
Palavras-chave: Espécie vegetal
Protocolo
Melhoramento genético
Série: (Embrapa Semi-Árido. Documentos, 205).
Tipo do material: Artigo em anais e proceedings
Acesso: openAccess
Aparece nas coleções:Artigo em anais de congresso (CPATSA)

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