Título:	Protocolo para análise proteônica de Colletotrichum gloeosporíoides.
Autor:	MESQUITA, R. O. MAIA, R. P. M. BEZERRA, M. A.
Afiliación:	Rosilene Oliveira Mesquita, UFC; Rebeca Peres Moreno Maia, UECE; Marlos Alves Bezerra, CNPAT.
Año:	2007
Referencia:	In: ENCONTRO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA AGROINDÚSTRIA TROPICAL, 5., 2007, Fortaleza, CE. Resumos... Fortaleza: Embrapa Agroindústria Tropical, 2007.
Descripción:	O fungo Colletotrichum gloeosporioides causa a antracnose do cajueiro, doença que promove perdas consideráveis na produtividade das plantas. Em função da importância dessa doença e da dificuldade do seu controle, faz-se necessário a utilização de novas ferramentas para o estudo da interação patógeno-hospedeiro, visando o manejo adequado da doença. Nesse sentido o presente trabalho teve por objetivo definir um protocolo de extração e análise por eletroforese bidimensional das proteínas expressadas diferencialmente em função da interação Colletotrichum-cajueiro. O fungo crescido em meio líquido foi filtrado a vácuo, macerado com nitrogênio líquido e liofilizado. Para a extração das proteínas, o material liofilizado foi adicionado a uma solução de TCA 10%, homogeneizado e centrifugado, com o precipitado coletado e lavado com acetona gelada. Em seguida, o material foi novamente centrifugado e o precipitado final recolhido, secado e armazenado a -20 2 C para posterior análise. As proteínas extraídas foram inicialmente colocadas em tampão de solubilização, seguido de centrifugação e coleta do sobrenadante. Após a quantificação das proteínas pelo Comassie Blue, ocorreu a focalização isoelétrica. As proteínas foram carregadas diretamente no gel de focalização com gradiente de pH imobilizado, na faixa de 3 a 1 O. A focalização das proteínas foi feita em um IPGphor. A segunda dimensão foi realizada em géis de poliacrilamida e a detecção das proteínas resolvidas em 2-DE/SDS-PAGE foi feita através da afinidade das proteínas pela prata. A análise dos géis bi- dimensionais foi feita, inicialmente, através da digitalização das imagens captadas em lmageScanner li. Os géis foram comparados e os "spots" de proteínas foram determinados pela massa molecular e ponto isoelétrico com o emprego do Software lmageMaster 2D. O presente protocolo mostrou-se eficiente para a análise proteômica do fungo.
NAL Thesaurus:	Colletotrichum
Tipo de Material:	Resumo em anais e proceedings
Acceso:	openAccess
Aparece en las colecciones:	Resumo em anais de congresso (CNPAT)