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Campo DCValorIdioma
dc.contributor.authorPINHEIRO, R. R.pt_BR
dc.contributor.authorOLORTEGUI, C. C.pt_BR
dc.contributor.authorGOUVEIA, A. M. G.pt_BR
dc.contributor.authorARAÚJO, S. C.pt_BR
dc.contributor.authorBOHORQUES, K.pt_BR
dc.date.accessioned2011-10-27T00:01:35Z-
dc.date.available2011-10-27T00:01:35Z-
dc.date.created2004-10-14pt_BR
dc.date.issued2002pt_BR
dc.identifier.citationIn: CONGRESSO BRASILEIRO DE MEDICINA VETERINÁRIA, 29., 2002, Gramado, RS. Saúde ambiental, animal e humana: uma questão de sobrevivência: anais. Gramado: Sociedade Brasileira de Medicina Veterinária, 2002. 1 CD ROM.pt_BR
dc.identifier.urihttp://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/528725pt_BR
dc.descriptionNo processo de purificação das proteínas dos lentivírus para produção de antígenos (Ags) ocorrem perdas principalmente das glicoproteinas por serem relativamente instáveis. Optou-se pela utilização de cromatografia em coluna de afinidade na purificação de proteínas do lentivírus caprino (LVC). No preparo da coluna de afinidade utilizou-se soro de caprinos positivo ao teste de microimunodifusão em gel de ágar (MIDGA) e pool de lotes de soro reagente integrante do kit comercial. A IgG foi obtida por precipitação em sulfato de amônio. A coluna foi preparada com proteina A imobilizada em sefarose CL-4B. Foi purificado o antígeno lote 1 (AgL1) obtido por concentração do sobrenadante de subcultivos de células de membrana sinovial caprina infectadas com LVC. O antigeno comercial (Agkit), AgL1 e o antígeno purificado (AgL1CA) foram submetidos a eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE), immunoblotting e ELISA indireto. Na eletroforese verificou-se no AgL1CA quatro proteínas de peso molecular (PM) aproximado: 8OkDa, 70kDa, 55kDa e 27kDa. No immunoblotting verificou-se que todos os Ags apresentaram uma banda de aproxitnadanente 27 kDa, sendo que, no AgL1CA ela foi mais intensa. No AgL1CA e AgL1 constatou-se outra banda de PM aproximado de 48 kDa, entretanto sendo bem mais forte no AgL1CA. No AgL1 observou-se, tanbém, uma banda com 70 kDa. Verificou-se, também, a presença da glicoproteina com PM variando de 140 a 145 kDa em todos os antígenos. Nos AgL1 e AgL1CA observou-se, ainda, uma banda de PM de 19kDa. Comparando as bandas observadas por SDS-PAGE com as do immunoblotting, pode-se verificar que nos AgKit e AgL1 somente a proteína p28 apareceu nitidamente. No ELISA indireto utilizando o AgL1CA observou-se que a diluição do soro de 1:200 e 200ng de antígeno apresentou uma diferença, entre as densidades ópticas do pool de soros positivos e negativos, de aproximadamente O,5 que viabiliza o desenvolvimento deste teste. Diante dos resultados verificou-se que o uso da cromatografia de afinidade é uma alternativa viável na obtenção de antígenos altamente purificados.pt_BR
dc.language.isoporpt_BR
dc.rightsopenAccesspt_BR
dc.titlePurificação de antígenos do lentivirus caprino por coluna de afinidade.pt_BR
dc.typeResumo em anais e proceedingspt_BR
dc.date.updated2019-09-25T11:11:11Zpt_BR
dc.subject.thesagroCaprinopt_BR
dc.subject.thesagroAntígenopt_BR
dc.subject.nalthesaurusGoatspt_BR
dc.subject.nalthesaurusLentiviruspt_BR
dc.subject.nalthesaurusAntigenspt_BR
riaa.ainfo.id528725pt_BR
riaa.ainfo.lastupdate2019-09-25 -03:00:00pt_BR
dc.contributor.institutionEmbrapa Caprinos.pt_BR
Aparece nas coleções:Resumo em anais de congresso (CNPC)

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