Título:	Otimização e seleção de primers RAPD para caracterização molecular de acessos de Angico de bezerro (Piptadenia moniliformis Benth.).
Autoria:	DANTAS, I. M. S. MENDES, R. F. de M. NASCIMENTO, M. do P. S. C. B. LIMA, P. S. da C.
Afiliação:	IONNE MARTINS SOARES DANTAS, FACULDADE DE SAÚDE, CIÊNCIAS HUMANAS E TECNOLÓGICAS DO PIAUÍ - NOVAFAPI; RAUL FERREIRA DE MIRANDA MENDES, UNIVERSIDADE ESTADUAL DO PIAUÍ; MARIA DO PERPETUO S C B NASCIMENTO, CPAMN; PAULO SARMANHO DA COSTA LIMA, CPAMN.
Ano de publicação:	2010
Referência:	In: CONGRESSO BRASILEIRO DE RECURSOS GENÉTICOS; WORKSHOP EM BIOPROSPECÇÃO E CONSERVAÇÃO DE PLANTAS NATIVAS DO SEMI-ÁRIDO, 3.; WORKSHOP INTERNACIONAL SOBRE BIOENERGIA E MEIO AMBIENTE, 2010, Salvador. Bancos de germoplasma: descobrir a riqueza, garantir o futuro: anais. Brasília, DF: Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, 2010.
Conteúdo:	Objetivou-se otimizar a reação de amplificação e selecionar primers RAPD (Random Amplified Polimorfic DNA) para análises de variabilidade genética em 10 acessos de angico de bezerro que compõem o Banco Ativo de Germoplasma de Forrageiras Nativas da Embrapa Meio-Norte. Na otimização foram testados quatro concentrações de MgCl2 (1,5mM, 2,0mM, 2,5mM e 3,0mM) e duas concentrações de Tampão ( 1,1X e 1,2X ). As reações foram realizadas com duas etapas de desnaturação, sendo a primeira de 1 min a 92°C,seguida de 45 ciclos de 40 seg a 92°C para desnaturação, 1 min a 34°C para anelamento, 2 min a 72°C e uma extensão final de 5 min a 72°C, em um Termociclador Applied Biosystems modelo Veriti. Após otimização, a reação de amplificação foi definida e realizada com as seguintes concentrações: 15ng de DNA molde, 0,75 mM de dNTP, 1U de Taq Polimerase (Cenbiot), 0,2μM de primer, 3,0mM de MgCl2, 2,4μl de Tampão 1,2X e água miliQ, em um volume final de 20μl, proporcionando assim um bom padrão de bandas. Foram testados 68 primers RAPD do grupo B, verificando-se a amplificação e o polimorfismo dos primers testados.
Thesagro:	Banco de Germoplasma
Palavras-chave:	Reação PCR Poliformismo
Série:	(Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. Documentos, 304).
Tipo do material:	Resumo em anais e proceedings
Acesso:	openAccess
Aparece nas coleções:	Resumo em anais de congresso (CPAMN)