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http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/1158327
Title: | Modelagem e produção de espidroína sintética de seda de aranha para aplicações biomédicas. |
Authors: | SOUSA, G. P. de![]() ![]() SOUSA, G. P. de ![]() ![]() LACERDA, V. A. M. ![]() ![]() ROSINHA, G. M. S. ![]() ![]() RECH FILHO, E. L. ![]() ![]() SOUTO, B. de M. ![]() ![]() QUIRINO, B. F. ![]() ![]() ALMEIDA, J. R. M. de ![]() ![]() BITTENCOURT, D. M. de C. ![]() ![]() |
Affiliation: | GLEICIANE PINHEIRO DE SOUSA, UNIVERSIDADE FEDERAL DO TOCANTINS; GLEICIANE PINHEIRO DE SOUSA, UNIVERSIDADE FEDERAL DE TOCANTINS; VALQUÍRIA ALICE MICHALCZECHEN LACERDA, UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA; GRACIA MARIA SOARES ROSINHA, Cenargen; ELIBIO LEOPOLDO RECH FILHO, Cenargen; BETULIA DE MORAIS SOUTO, CNPAE; BETANIA FERRAZ QUIRINO, CNPAE; JOAO RICARDO MOREIRA DE ALMEIDA, CNPAE; DANIELA MATIAS DE C BITTENCOURT, Cenargen. |
Date Issued: | 2023 |
Citation: | In: ENCONTRO DE PESQUISA E INOVAÇÃO DA EMBRAPA AGROENERGIA, 7., 2023, Brasília, DF. Anais... Brasília, DF : Embrapa, 2023. p. 153. |
Description: | Sedas de aranhas são biopolímeros com extraordinárias características físico‑químicas. Elas podem ser processadas e utilizadas em diversos biomateriais inovadores como partículas, além da forma natural de fibras. Entretanto, por causa da limitação da obtenção desse material in natura, é necessário o desenvolvimento de sistemas de produção heteróloga de proteínas de seda de aranha (espidroínas). Neste trabalho, buscou‑se, por meio da biologia sintética, a produção de uma espidroína em Eschericha coli BL21(DE3). A espidroína sintética foi baseada na sequência da proteína MaSp2 da aranha do Cerrado brasileiro Parawixia bistriata, aqui denominada Engenheirada 1 (Eng1). Para isso, a espidroína Eng1 foi sintetizada no plasmídeo pET24a, contendo um peptídeo‑sinal de secreção de uma β‑xilosidase e mais oito repetições da região de interesse da MaSp2, além de regiões bioativas para endereçamento celular. As bactérias foram transformadas, e as proteínas foram produzidas por autoindução em frasco Erlenmeyer de 2 L. Logo após, as células foram precipitadas por centrifugação, e o sobrenadante foi concentrado por ultrafiltração para posterior purificação das espidroínas por cromatografia de afinidade. A produção da Eng1, com 33,54 kDa, foi confirmada por SDS‑PAGE corado com nitrato de prata e Western blot. A partir deste trabalho, foi possível desenvolver um sistema heterólogo para a produção de espidroínas sintéticas de sedas de aranhas. A vantagem deste sistema está na capacidade do peptídeo‑sinal de secretar a espidroína sintética para o meio de cultura. |
Thesagro: | Escherichia Coli Biologia Aranha Plasmídeo |
Keywords: | Parawixia bistriata MaSp2 Espidroína sintética |
Type of Material: | Artigo em anais e proceedings |
Access: | openAccess |
Appears in Collections: | Artigo em anais de congresso (CNPAE)![]() ![]() |
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