Title:	ELISA com MSP5 recombinante truncada para detecção de anticorpos contra Anaplasma marginale em bovinos.
Authors:	MELO, E. S. P. ARAUJO, F. R. RAMOS, C. A. N. SOARES, C. O. ROSINHA, G. M. S. ELISEI, C. MADRUGA, C. R.
Affiliation:	ELAINE S. P. MELO, UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO DO SUL; FLABIO RIBEIRO DE ARAUJO, CNPGC; CARLOS ALBERTO NASCIMENTO RAMOS, UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO DO SUL; CLEBER OLIVEIRA SOARES, CNPGC; GRACIA MARIA SOARES ROSINHA, CNPGC; CARINA ELISEI, UNIVERSIDADE CATÓLICA DOM BOSCO; CLAUDIO ROBERTO MADRUGA, CNPGC.
Date Issued:	2007
Citation:	Pesquisa Veterinária Brasileira, v. 27, n. 7, p. 301-306, jul. 2007.
Description:	Os objetivos deste estudo foram produzir e solubilizar a proteína MSP5 recombinante truncada de Anaplasma marginale, e avaliar seu desempenho em um ensaio de imunoadsorção enzimática indireto (ELISA) para detecção de anticorpos contra a riquétsia. O gene msp5, exceto a região N-terminal hidrofóbica, foi amplificado por PCR, clonado em plasmídeo pTrcHis-TOPO e expresso em Escherichia coli. A solubilização da proteína recombinante foi avaliada em diferentes pHs e concentrações de uréia. A sensibilidade e a especificidade do ensaio foram avaliados testando-se 66 soros de animais infectados experimentalmente com A. marginale e 96 soros negativos, com o estado de infecção destes animais confirmado por PCR. Um total de 1.666 amostras de soros bovino, provenientes do Brasil - Rio Grande do Sul (73), Mato Grosso do Sul (91), Pernambuco (86), Bahia (314) e Minas Gerais (267)-, Uruguai (32) e Costa Rica (803) foram testadas nos ELISAs com MSP5 truncada e com MSP1a recombinantes e a concordância entre os dois testes foi avaliada. O ELISA indireto com MSP5 truncada foi capaz de detectar animais infectados com 96,97% de sensibilidade e 100% de especificidade. Nos animais infectados experimentalmente, o ELISA detectou anticorpos do 12º até o último dia de observação (37º dia). Os ELISAs para MSP5 e MSP1a apresentaram concordância de 95,67%, com índice kappa de 0,81. Os resultados discordantes apresentaram uma diferença significativa (p <0,001). Anticorpos contra A. marginale foram detectados em animais de todas as regiões estudadas. O ELISA com MSP5 recombinante truncada apresentou bom desempenho na detecção de anticorpos contra A. marginale, com alta sensibilidade e especificidade, representando uma importante ferramenta para o diagnóstico da anaplasmose bovina em estudos epidemiológicos.
Thesagro:	Anaplasma Marginale Anaplasmose Bovino Elisa Escherichia Coli Imunologia
NAL Thesaurus:	Anaplasmosis Cattle Immunology Solubilization Recombinant proteins
Keywords:	MSP5
DOI:	https://doi.org/10.1590/S0100-736X2007000700008
Type of Material:	Artigo de periódico
Access:	openAccess
Appears in Collections:	Artigo em periódico indexado (CNPGC)