Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/1016972
Registro completo de metadatos
Campo DCValorLengua/Idioma
dc.contributor.authorCAITANO, M. A. B.pt_BR
dc.contributor.authorJANK, C. C.pt_BR
dc.contributor.authorSANTOS, L. R. dospt_BR
dc.contributor.authorSOARES, C. O.pt_BR
dc.contributor.authorROSINHA, G. M. S.pt_BR
dc.date.accessioned2015-06-03T11:11:11Zpt_BR
dc.date.available2015-06-03T11:11:11Zpt_BR
dc.date.created2015-06-03pt_BR
dc.date.issued2013pt_BR
dc.identifier.citationBio(in)formação, v. 6, n. 6, 2013.pt_BR
dc.identifier.urihttp://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/1016972pt_BR
dc.descriptionA brucelose é uma das doenças emergentes mais importantes mundialmente na atualidade, afetando diversas espécies animais e o homem. A situação brasileira no controle de doenças infecciosas de animais requer melhorias para atingir os padrões internacionais e aumentar a produção. Por estes motivos o MAPA vem incentivado o desenvolvimento de novas vacinas e formas de diagnósticos para a brucelose bovina. Enzimas metabólicas têm sido descritas no envolvimento da virulência de Brucella abortus. Uma delas é a fosfoglicerato cinase (PGK), codificada pelo gene pgk. Neste trabalho objetivou-se a produção da proteína recombinante PGK (PGKr) de B. abortus em sistema heterólogo de expressão, para caracterização da cepa vacinal geneticamente modificada, B. abortus 2308 p r 8 pgk por western blot e posterior utilização em testes sorológicos. Para isto, foi realizada a extração de DNA genômico da cepa S2308 de B. abortus e o gene pgk foi amplificado pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) a partir de primers específicos. O produto da PCR foi ligado ao plasmídeo pMAL-c2E. O clone recombinante, foi submetido à indução da produção da proteína em Escherichia coli. A PGKr foi purificada por cromatografia de afinidade e duas frações purificadas foram dosadas por Bradford, obtendo-se 2,62 mg da PGKr. Camundongos BALB/c foram injetados com a proteína emulsionada em adjuvante Montanide, via subcutânea. Foram realizadas três inoculações com intervalos de três semanas. Quinze dias após as inoculações, os soros sanguíneos destes animais foram coletados e separados para avaliação pelo método de Western Blot. Os soros confirmaram a produção de anticorpos contra o antígeno e pode-se observar que no ensaio com a cepa selvagem o anticorpo reagiu mostrando que a produção da proteína PGK está intacta nesta cepa e com a cepa mutante S2308 08 pgk o anticorpo não reagiu, mostrando que a produção da proteína PGK é nula, confirmando realmente a deleção do gene pgk nesta cepa.por
dc.language.isoporpt_BR
dc.rightsopenAccesspt_BR
dc.subjectFosfoglicerato cinasept_BR
dc.titleClonagem e expressão heteróloga do gene pgk de Brucella abortus.pt_BR
dc.typeArtigo de periódicopt_BR
dc.date.updated2015-06-03T11:11:11Zpt_BR
dc.subject.thesagroBrucelosepor
dc.subject.thesagroBovinopor
dc.subject.thesagroClonagempor
dc.subject.nalthesaurusBrucellaceaepor
dc.format.extent2p. 249-266por
riaa.ainfo.id1016972pt_BR
riaa.ainfo.lastupdate2015-06-03pt_BR
dc.contributor.institutionMARRIELEN APARECIDA BENITES CAITANO, UNIVERSIDADE PARA O DESENVOLVIMENTO DO ESTADO E DA REGIÃO DO PANTANALpt_BR
dc.contributor.institutionCARINA CALIXTO JANK, UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO DO SULpor
dc.contributor.institutionLENITA RAMIRES DOS SANTOS, CNPGCpor
dc.contributor.institutionCLEBER OLIVEIRA SOARES, CNPGCpor
dc.contributor.institutionGRACIA MARIA SOARES ROSINHA, CNPGC.por
Aparece en las colecciones:Artigo em periódico indexado (CNPGC)

Ficheros en este ítem:
Fichero Descripción TamañoFormato 
18.pdf720.89 kBAdobe PDFVista previa
Visualizar/Abrir
Mostrar el registro sencillo del ítem

FacebookTwitterDeliciousLinkedInGoogle BookmarksMySpace