Title:	Desenvolvimento de metodologia de cultivo de hepatócitos bovinos in vitro para estudos moleculares e bioquímicos.
Authors:	MEDEIROS, G. X. de VIEIRA, F. OLIVEIRA, T. PAIVA, R. BARBOSA, M. MACHADO, M. A. MARTINS, M. F. BRANDAO, H. de M. CARVALHO, W. A.
Affiliation:	GIULIANA XAVIER DE MEDEIROS, UNIVERSIDADE FEDERAL DE JUIZ DE FORA; FELIPE VIEIRA, UNIVERSIDADE FEDERAL DE JUIZ DE FORA; THIAGO OLIVEIRA, UNIVERSIDADE FEDERAL DE JUIZ DE FORA; RAQUEL PAIVA, UNIVERSIDADE FEDERAL DE JUIZ DE FORA; MARIANA BARBOSA, UNIVERSIDADE FEDERAL DE JUIZ DE FORA; MARCO ANTONIO MACHADO, CNPGL; MARTA FONSECA MARTINS, CNPGL; HUMBERTO DE MELLO BRANDAO, CNPGL; WANESSA ARAUJO CARVALHO, CNPGL.
Date Issued:	2017
Citation:	In: WORKSHOP DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA GADO DE LEITE, 20., 2017, Juiz de Fora. Anais... Juiz de Fora: Embrapa Gado de Leite, 2017.
Description:	O fígado é responsável pela regulação do metabolismo animal e produção de proteínas do sistema imune, sendo o estudo de suas vias essencial para o entedimento de processos como sinalização intracelular e análise de rotas metabólicas. Para tal, foi desenvolvida uma metodologia de isolamento e cultivo primário de hepatócitos bovinos in vitro. Hepatócitos foram isolados de fígado bovino pelo método enzimático sem perfusão com colagenase tipo II. O método de exclusão por Azul de Trypan foi usado para determinar o rendimento total de células e a taxa de sobrevivência dos hepatócitos cultivados na ausência de matriz, em placas recobertas com colágeno ou gelatina. RNA foi extraído das células isoladas, quantificado com Nanodrop e a qualidade foi analisada através do Bioanalyzer. Os resultados apontaram um rendimento de cerca de 1,7x106 células viáveis/g de fígado onde hepatócitos bovinos apresentaram maior integridade morfológica quando cultivados em monocamada de gelatina , com uma média de viabilidade de 52,5%. A quantidade e integridade do RNA também foram superiores nesta configuração de matriz. O estabelecimento de um protocolo de cultivo de hepatócitos bovinos será uma ferramenta útil para estudos de metabolização de drogas, imunomodulação e sinalização intracelular impactando sobre a agilidade em testes e obtenção de novos fármacos para o campo veterinário.
Keywords:	Cultivo celular Hepatócito Isolamento celular
Series/Report no.:	(Embrapa Gado de Leite. Documentos, 211).
Type of Material:	Artigo em anais e proceedings
Access:	openAccess
Appears in Collections:	Artigo em anais de congresso (CNPGL)