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Research center of Embrapa/Collection: Embrapa Acre - Artigo em anais de congresso (ALICE)
Date Issued: 2010
Type of Material: Artigo em anais de congresso (ALICE)
Authors: MATOS, I. S. de P.
BARBOSA, E. M.
MAIA, M. C. C.
RAPOSO, A.
TEIXEIRA, R. B.
Additional Information: Izabelle S. de Paulo Matos, Universidade Federal do Acre (Ufac); Edilene Machado Barbosa, União Educacional do Norte (Uninorte); MARIA CLIDEANA CABRAL MAIA, CNPAT; ANDREA RAPOSO, CPAF-AC; RENATA BELTRAO TEIXEIRA, CPAF-AC.
Title: Comparação entre protocolos para extração de DNA de cupuaçu (Theobroma grandiflorum).
Publisher: In: SEMINÁRIO ANUAL DE COOPERAÇÃO UFAC-UC, 7., 2010. Rio Branco, AC. Anais... Rio Branco, AC: UFAC; Flórida: Universidade da Califórnia, 2010.
Language: pt_BR
Keywords: Fitomejoramiento
Cupuassu
ADN
Extracción
Description: O cupuaçu é uma espécie nativa na região Amazônica que se encontra em estágio inicial de domesticação, apresentando ampla variabilidade genética para as diversas características. Contudo, poucos são os estudos que envolvem avaliações moleculares nesta espécie. A otimização de um protocolo para extração de DNA é pré-requisito básico para etapas subseqüentes da análise molecular. Com o objetivo realizar amplificação e melhoria da qualidade e quantidade de DNA obtido dessa espécie, o presente trabalho compara protocolos de extração de DNA do cupuaçu. Os protocolos utilizados foram o de Doyle e Doyle (1990), modificado por FIGUEIRA et al. (1997) com a utilização de proteinase K, e o Doyle e Doyle (1990), modificado por FERREIRA GRA TTAP AGLIA (1998) estabelecido para várias espécies e já utilizado no setor de Biologia Molecular do Laboratório de Morfogênese e Biologia Molecular da EMBRAPA-Acre, em ambos os protocolos também foram feitos os testes com beads de cerâmica e de tungstênio. Os resultados obtidos na quantificação das amostras mostraram que o emprego da proteinase K produziu um DNA mais limpo. Porém, quando se compara esta metodologia com a que não utilizou a proteinase K, verificou-se uma menor quantidade de DNA extraído. A utilização das beads de cerâmica proporcionou um aumento significativo na quantidade de DNA, no entanto, não se obteve boa qualidade, apresentando DNA fragmentado. Em meio a esses resultados pode-se constatar que o uso das beads de tungstênio e sem o emprego da proteinase K possibilitaram a extração de um DNA com melhor qualidade e quantidade. Cupuassu is a native species in the Amazon region that finds in initial stage of domesticated, that has ample genetic variability for the diverse characteristics. However, few studies that involve molecular evaluations in this species. The optimization of a protocol of DNA extraction is basic prerequisite for subsequent steps the molecular analysis. With the objective J of realization the amplification and improvement of the quality and amount in DNA of this species, the present work compares two protocols of DNA extraction. The protocols of extraction ofDNA that utilized were Doyle and Doyle (1990), modified for FIGUEIRA et al. (1997) with the use of proteinase K, and the Doyle and Doyle (1990), modified for FERRERIA and GRA TTAP AGLIA (1998) established for some species and used in the sector of Molecular Biology in the Laboratory of Morphogenesis and Molecular Biology of EMBRAPA-Acre, in both of protocols also were made the tests with ceramics and tungsten beads. The results obtained in quantification of samples had shown that the used of proteinase K produced a cleaner DNA. However, when this methodology is compared with that did not use proteinase K, was verified a few amount of extracted DNA. The use of beads of ceramics provided a significant increase in the DNA amount, however, did not get good quality, shown DNA fragmented. These results evidenced that the use of tungsten beads and no utilization of proteinase K makes possible the better quality and amount in DNA extration.
Thesagro: Melhoramento Genético Vegetal
Cupuaçu
Theobroma Grandiflorum
DNA
Extração
NAL Thesaurus: Plant breeding
Extraction
Data Created: 2010-11-05
Appears in Collections:Artigo em anais de congresso (CPAF-AC)

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