Title:	Avaliação de métodos para obtenção de proteínas recombinantes.
Authors:	SANTOS JUNIOR, A. G. dos PIRAINE, R. E. A. CUNHA, R. C. NIZOLI, L. Q. ANDREOTTI, R. LEITE, F. P. L.
Affiliation:	Alceu Gonçalves dos Santos Junior, Doutorando/Programa de Pós-Graduação em Veterinária/UFPEL; Renan Eugênio Araújo Piraine, Doutorando/Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia/UFPEL; Rodrigo Casquero Cunha, Pós-Doc/Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia/UFPEL; Leandro Quintana Nizoli, Professor/Doutor/Faculdade de Veterinária/UFPEL; RENATO ANDREOTTI E SILVA, CNPGC; Fábio Pereira Leivas Leite, Professor/Doutor/Curso de Biotecnologia/UFPEL.
Date Issued:	2017
Citation:	Science and Animal Health, v.5, n.2, p. 166-177, maio/ago. 2017.
Description:	A utilização de Pichia pastoris para a produção de proteínas recombinantes apresenta inúmeras vantagens que esse sistema agrega, destacando-se a exportação das moléculas para o meio extracelular. Isto permite que a obtenção das proteínas possa ser realizada por métodos de precipitação, com uso de sais neutros ou solventes orgânicos, sem trazer prejuízos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a utilização de sulfato de amônio, acetona e metanol para obtenção da proteína recombinante Bm86 do carrapato Rhipicephalus microplus expressa por P. pastoris. A ação provocada pelos solventes orgânicos ocasionou uma solubilidade parcial das proteínas. Na quantificação por densitometria da proteína rBm86-CG, verificou-se que utilizando acetona (1:2) foi obtido 30,3 mg/L, metanol (1:2) 60,5 mg/L e com sulfato de amônio a 70% (83,5 mg/L). A manutenção das características antigênicas após a precipitação foi verificada pela técnica de Western Blot, sendo que a proteína rBm86-CG obtida pelos três métodos foi reconhecida por anticorpos específicos. Os resultados sugerem que a precipitação com sais neutros e solventes orgânicos pode ser utilizada para obtenção de proteínas recombinantes como a rBm86-CG, sem trazer prejuízos a sua antigenicidade.
Thesagro:	Solvente orgânico
NAL Thesaurus:	Pichia pastoris Rhipicephalus microplus
Keywords:	Sais neutros Antigenicidade
Type of Material:	Artigo de periódico
Access:	openAccess
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