Title:	Amplificação por PCR do rDNA 16S de bactérias patogênicas presentes em queijo coalho.
Authors:	SILVA, R. S. da FEITOSA, T. CORREIA, T. O. GRANGEIRO, T. B.
Affiliation:	Rosana Sousa da Silva, FATEC; Terezinha Feitosa, CNPAT; Tuana Oliveira Correia, UFC; Thalles Barbosa Grangeiro, UFC.
Date Issued:	2007
Citation:	In: ENCONTRO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA AGROINDÚSTRIA TROPICAL, 5., 2007, Fortaleza. Resumos... Fortaleza: Embrapa Agroindústria Tropical, 2007.
Description:	Os produtos lácteos são passíveis de contaminação por diferentes agentes etiológicos, que podem levar ao desenvolvimento de doenças em humanos, desencadeadas por microrganismos patogênicos ou suas toxinas. O risco que a presença de patógenos representa nos alimentos para os consumidores, mostra a necessidade de utilizar métodos rápidos na detecção e diagnóstico de microrganismos, como por exemplo, o PCR (Polymerase Chaín Beactíon). Este método é altamente sensível e específico, e vem sendo empregado com êxito em análise de produtos de origem animal para a detecção de vários microrganismos. O presente trabalho objetivou relatar a amplificação do gene que codifica o rRNA 16S (chamado rDNA 16S), usando o método de PCR, em isolados de Salmonella sp. e Stapphylococcus aureus presentes em queijo coalho. Inicialmente, a presença de Salmonella sp. nas amostras foi verificada de acordo com Andrews e Hammack (2005), enquanto que a presença de S. aureus foi determinada nessas mesmas amostras segundo Lancette e Tatini {1992}. Em seguida, realizou-se a extração de DNA genômico em 12 cepas de Salmonella sp. e em 16 cepas de Staphylococcus aureus isoladas de diferentes laticínios, segundo uma metodologia que utiliza o reagente CT AB. O sucesso na obtenção de amostras de DNA genômico de todas as cepas usadas foi confirmado por eletroforese em gel de agarose 0,8% (p/v). O gene rDNA 16S foi amplificado a partir das amostras de DNA genômico obtidas, via PCR, usando-se os iniciadores 27F (5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3') e 1525R (5'-AAGGAGGTGATCCAGCC-3'). A análise dos produtos da reação, por eletroforese em gel de agarose 1 %, revelou a amplificação, em todas as amostras, de uma única banda de DNA com aproximadamente 1.400-1.500 pb, o que está de acordo com o tamanho do rDNA 16S. Esse resultado demonstra que as amostras de DNA genômico extraídas das cepas de Salmonella sp. e S. aureus possuem um grau de pureza suficiente para sua posterior identificação pelo seqüenciamento do rDNA 16S.
Keywords:	Bactérias patogênicas
Type of Material:	Resumo em anais e proceedings
Access:	openAccess
Appears in Collections:	Resumo em anais de congresso (CNPAT)