Title:	Extração de DNA de bactérias ácido láticas: adequação de protocolo.
Authors:	FURTADO, A. K. BRUNO, L. M. QUEIROZ, A. A. de BORGES, M. de F.
Affiliation:	Ana Karine Furtado, UFC; Laura Maria Bruno, CNPAT; Ana Amélia de Queiroz, UFC; Maria de Fátima Borges, CNPAT.
Date Issued:	2007
Citation:	In: ENCONTRO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA AGROINDÚSTRIA TROPICAL, 5., 2007, Fortaleza, CE. Resumos... Fortaleza: Embrapa Agroindústria Tropical, 2007.
Description:	Bactérias ácido láticas (BAL) são bastante empregadas como culturas iniciadoras de produtos lácteos fermentados. Os principais gêneros de BAL encontrados nos produtos lácteos são: Lactococcus, Lactobacillus, Leuconostoc, Streptococcus e Enterococcus. A microbiologia clássica identifica as espécies de BAL empregando técnicas que envolvem o cultivo dos microrganismos, seguidos de sua caracterização fenotípica. Muitas vezes tais métodos são pouco eficientes em separar espécies f enotipicamente relacionadas. Os métodos moleculares, por sua vez, apresentam como características a reprodutibilidade, automação e rapidez, sendo muitas vezes independentes de cultivo, podendo ser utilizados para confirmar a identificação clássica. O objetivo deste trabalho foi adequar um protocolo de extração de DNA para BAL. As extrações de DNA foram realizadas utilizando cepas padrões dos seguintes microrganismos: Streptococcus thermophilus NCDO 1968, Lactococcus lactis ATCC 14579 e Lactobacillus plantarum A TCC 8914. As principais variáveis testadas foram: concentração da suspensão bacteriana, concentração de lisozima e de proteinase K, emprego de soluções de clorofórmio e álcool isoamílico e de fenol-clorofórmio-álcool isoamílico. Considerando a pureza do DNA, o protocolo mais apropriado para Streptococcus thermophilus foi aquele no qual foram utilizadas soluções de fenol-clorofórmio-álcool isoamílico, lisozima a 4mg/ml e proteinase K a 6mg/ml. Para Lactococcus lactis o protocolo mais adequado foi o que empregou soluções de clorofórmio e álcool isoamílico separadamente, e soluções de lisozima e proteinase K nas concentrações de 0.5 mg/ml e 1 mg/ml, respectivamente. Nenhum dos protocolos testados mostrou-se adequado para extração de DNA de Lactobacillus plantarum. Também foi observado que a concentração da suspensão celular não interferiu nos resultados da extração.
Keywords:	Bactérias ácido láticas
Type of Material:	Resumo em anais e proceedings
Access:	openAccess
Appears in Collections:	Resumo em anais de congresso (CNPAT)